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如何正確保存和使用ELISA試劑盒?
一、保存方法
未開封試劑盒
核心組分(如酶標(biāo)抗體、底物)需按標(biāo)簽溫度保存,通常為2-8℃(部分需-20℃)。
TMB顯色液、終止液等光敏感試劑需避光保存于4℃。
開封后處理
剩余酶標(biāo)板需密封并添加干燥劑,保存于-20℃防潮。
分裝試劑(如標(biāo)準(zhǔn)品)避免反復(fù)凍融,建議按單次用量分裝后凍存(-20℃或-70℃)。
特殊注意事項(xiàng)
凍干試劑需用無(wú)菌緩沖液溶解,分裝后標(biāo)記保存日期。
不同批號(hào)試劑禁止混用,開封后需在保質(zhì)期內(nèi)使用。
二、樣本處理與保存
血液樣本
血清:采集后1000×g離心10分鐘分離,避免溶血或脂血干擾。
血漿:使用EDTA/肝素抗凝,3000×g離心30分鐘取上清。
保存條件
短期(1周內(nèi)):2-8℃。
中長(zhǎng)期:分裝后-20℃(1個(gè)月內(nèi))或-70℃(6個(gè)月內(nèi))。
三、實(shí)驗(yàn)操作要點(diǎn)
加樣與溫育
加樣角度垂直,避免交叉污染;溫育時(shí)間需嚴(yán)格按說明書控制。
洗滌與顯色
手工洗板需垂直拍干,避免殘留液體;顯色反應(yīng)需全程避光。
數(shù)據(jù)讀取
終止反應(yīng)后立即用酶標(biāo)儀讀取OD值,建議采用四參數(shù)擬合分析。
四、常見問題規(guī)避
溶血/高脂血:此類樣本需離心或過濾后檢測(cè)。
試劑失效:使用前檢查是否變色或沉淀,異常則棄用。
溫度控制:所有試劑使用前需平衡至室溫(除特殊說明外)。
通過規(guī)范保存和操作,可顯著提升實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。
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